تصاویری از کلریناتور

 

 

جدول MPN بر گرفته از استاندار متد

آزمایش میکروبی آب و فاصلاب

1- مرحله احتمالی : در این مرحله از محیط کشت لاکتوز براث با دو رقت ضعیف و قوی استفاده میکنیم بدین ترتیب

 

 که سه لوله لاکتوز براث قوی و شش لوله لاکتوز براث ضعیف را به ترتیب در یک جا لوله قرار می دهیم . در سه

 

 لوله اول که لاکتوز براث قوی است به میزان 10cc از نمونه آب را اضافه می کنیم ، در سه لوله دوم که لاکتوز براث

 

 ضعیف است به میزان 1cc و در سه لوله سوم که آن هم لاکتوز براث ضعیف است به میزان 0.1cc از نمونه آب را

 

 اضافه می کنیم . بعد از آن لوله ها را بهم زده در داخل انکوباتور 35.5 – 37 درجه به مدت 24 -48  ساعت قرار می

 

 دهیم در این مرحله احتمال وجود باکتری ها بررسی می شوند و با واحد MPN در هر 100 میلی لیتر گزارش می شود .

 

ادامه نوشته

طرز تهیه محیطهای کشت

مقدار مشخصی از پودر را که روی آن درج شده است را در یک لیتر آب حل می کنیم سپس حرارت می دهیم تا بخار از سطح آن   متصاعد شود شود و محیط کشت شفاف شود  پس از خنک شدن آنرا در داخل لوله های آزمایش که محتوی لوله درهام می باشند  می ریزیم . درب لوله ها را بوسیله پنبه می بندیم  سپس اتوکلاو می کنیم . استاندارد اتوکلاو دمای 121'C و فشار15 psi   و زمان 15-20 min  می باشد . پس از اتوکلاو محیط های کشت را در داخل یخچال تا زمان آزمایش قرار می دهیم .

 

ادامه نوشته

آزمایش HPC

تعداد کلنی های باکتریایی داخل یا روی محیط های جامد حاوی ترکیبات آلی نظیر منابع انرژی و کربن اطلاعاتی را درمورد غلظت و تراکم باکتریهای هتروتروفیک قابل کشت در آب و یا دیگر
محیط های  مورد بررسی به ما می دهد. این مورد به عنوان شمارش بشقابی هتروتروفیک (HPC) خوانده می شود که در ابتدا توسط کخ[2] در سال 1881 مورد استفاده قرار گرفت و اولین ابزار نشان دهندة کیفیت میکروبی آب (تصفیه شده ) بود. چند سال بعد این روش در تعدادی از کشورهای اروپایی به کار گرفته شد(8).

ادامه نوشته

اصطلاحات و تعاریف در آزمایشگاه میکروبیولوژی

 کلیفرم ها

گروهی از باکتری های هوازی و بی هوازی اختیاری ، گرم منفی ، میله ای شکل و بدون اسپور هستند که قادرند در شرایط هوازی در محیط های کشت انتخابی لاکتوزدار در دمای 5/0 ± 35 درجه سلسیوس در مدت 24 تا  48 ساعت تولید اسید و گاز کنند .

     اساس روش

این روش  براساس تلقیح حجم معینی از نمونه آب به محیط انتخابی لاکتوز دار و گرمخانه گذاری در دمای 5/0 ± 35 درجه سلسیوس انجام می پذیرد . سپس با استفاده از محیط های کشت انتخابی و تائیدی ، وجود کلیفرم ها تائید می شود . 

  نمونه برداری

دست کم 500 میلی لیتر آب را ( طبق استاندارد ملی 4208 ) سال 1376 آئین کار نمونه برداری از آب جهت آزمونهای باکتریولوژی نمونه برداری کنید .

    

ادامه نوشته

آیین‌کار آزمون‌های باکتریولوژیکی آب

1- هدف

 هدف از تدوین این آئین‏کار , ارائه یک راهنما 1 جهت انجام آزمون‏های باکتریولوژیکی آب می‏باشد            

 این آئین کار شامل آماده سازی نمونه

 و روش‏های مختلف شمارش انواع میکروارگانیسم‏هاست .

  2- دامنه کاربرد

 این آئین‏کار در مورد آب آشامیدنی , آب معدنی بطری شده , آب استخر و شناگاههای طبیعی کاربرد دارد .

 

ادامه نوشته

آزمایش شمارش بشقابی (HPC)

  

دانلود

آزمایش MPN با جزییات کامل

  

دانلود

رنگ آمیزی باکتریها

بعضی از باکتریها ماده لزجی از خود ترشح می کنند که خارج از سلول و پیرامون آن جمع می شود و دیواره سلولی را می پوشاند . این لایه کپسول نامیده می شود که ضخامتهای متفاوت و چسبندگی متغیر دارد. اندازه کپسول به محیط کشت میکروبی بستگی دارد و همچنین باکتریهای بیماریزا ، در بین باکتریهای تولید کننده کپسول ، کپسولهای بزرگتری دارند. جنس این کپسول از پلی ساکارید است که در آب محلول و غیر یونی است .

ادامه نوشته

گزارش کار آزمایشگاه میکروبیولوژی آب و فاضلاب

مقدمه

آب آشامیدنی آب گوارائی است که عوامل فیزیکی , شیمیائی و بیولوژیکی آن در حدی باشد که مصرف آن عارضه سوئی در کوتاه مدت و یا دراز مدت در انسان ایجاد نکند .

با توجه به اینکه در هنگام عبور آب در لوله‏ها امکاناتی جهت آلودگی وجود دارد لذا دو نکته اساسی باید مورد توجه قرار گیرد .

 الف : فشار آب درون شبکه لوله کشی باید در کلیه قسمتها بنحوی حفظ گردد که امکان انتقال , الودگی از خارج بدرون لوله‏ها فراهم نگردد .

 ب : میزان کلر باقیمانده باید در حدی باشد که آلودگیهای اتفاقی در شبکه را از بین ببرد

 

ادامه نوشته

آزمایش استرپتوکوک مدفوعی

نسبت  fc/fs   اگر بیشتر از 4.4 باشد ، منبع آلودگی انسانی است ، اگر کمتر از 0.7 باشد حیوانی است. اگر 0.6 باشد آلودگی اردک ، 0.4 باشد گوسفند و مرغ  ، 0.2  گاو  ، 0.1  بوقلمون می باشد.بین 0.7 تا 4.4 حیوانی و انسانی است. 0.7 تا   4.4  سورس آلودگی گرایش به حیوانی دارد . 2.2 تا 4.4 گرایش به انسانی دارد.

محیط های کشت

محیط کشت آزید دکستروز براث

محیط PSE آگار

آبگوشت NaCl 5/6 درصد

محیط کشت آزاید دکسترویز براس و حاوی سدیم آزایت  می باشد.

ادامه نوشته

تشخیص افتراقی باکتریهای کلیفرم

شناسایی باکتری هایی که شامل گروه کلیفرم هستند گاهی برای تعیین ماهیت آلودگی ضروری است. آزمایشهای افتراقی برای شناسایی باکتریهای فوق باید با این آگاهی انجام گیرد، که تمام سویه های طبقه بندی شده که به گروه کلیفرم نسبت داده شده ضرورتا نمی تواند با تعریف اعلام شده در این دستور کار کاملا مطابقت داشته باشد. زیرا برخی از باکتریها ممکن است لاکتوز را تخمیر نکنند و یا در صورت تخمیر گاز تولید نکنند. علاوه بر این باکتریهای گرم  منفی دیگر بجز کلیفرم ها، لاکتوز را تخمیر کرده و روی محیط کشت تولید درخشش می کنند(نظیر گونه های آئروموناس). اما تمام سویه های یک گونه واکنش یکسانی در محیط کشت نخواهند داشت. ارگانیسم ها جهش یافته، صدمه دیده و تغییر پذیر ممکن است به آزمایش ها پاسخ متفاوتی بدهند. هر چند آزمایش های متداول IMViC (یعنی ایندول، متیل رد، وگس پرسکوئر و معرف سیترات) برای تشخیص افتراقی کلیفرم ها مفید است اما شناسایی کاملی را فراهم نکرده و برای دستیابی به نتایج دقیق به آزمایش های بیوشیمیایی بیشتری نیاز است.

ادامه نوشته

قارچها و روشهای تشخیص آنها

قارچ ها یوکاریوتهای (دارای هسته ی مشخص) هتروتروف غیر فتوسنتتیک هستند که در دسته ی گیاهان قرار می گیرند. این ارگانیسم ها در شرایط هوازی رشد نموده و انرژی مورد نیاز خود را از اکسیداسیون مواد آلی تامین می کنند تولید مثل آنها به صورت جنسی یا غیر جنسی با تشکیل اسپور، جوانه زدن و تقسیم سلولی می باشد قارچ ها به سه دسته ی 1- مخمرها  2- کپک ها  و 3- شبه مخمرها تقسیم می شوند.

ادامه نوشته

آزمایش و تشخیص کلستریدیوم پرفرنژنس

کلستریدیوم ها باسیل های گرم مثبت  بیهوازی و میکروآئروفیلیک، اسپورزا، بی حرکت، درشت، با انتهای گرد هستند که به تعداد حدود 10000 عدد در هر گرم وزن مدفوع مرطوب در روده شخص سالم وجود دارند. آنها به طور وسیع در خاک و آب انتشار دارند به عنوان باکتری های ساپروفیت خاک محسوب می شوند و تحت شرایطی مانند بیماریزا های فرصت طلب عمل می کنند. نظر به قدرت تهاجمی پایین این باکتری ها به ندرت در غیاب فاکتورهای مساعد کننده یا تشدید کننده قادر به ایجاد بیماری هستند. بیماریزایی کلستریدیوم ها به توانایی آنها در تولید اگزوتوکسین های قوی نسبت داده می شود. سندرم بیماری ناشی از کلستریدیوم ها برحسب گونه مولد و شرایط عفونت یا توکسین متغیر است.

کلستریدیوم پرفرنژنس ساکن طبیعی روده بوده و علیرغم تعداد کمتر نسبت به E.coli، چون اسپور آن می تواند برای مدت طولانی در آب باقی بماند حتی زما نی که تمام باکتریهای مدفوعی از بین رفته ا ند در آب باقی می ماند چنانچه کلیفرم های دیگر به جز کلیفرم های مدفوعی در آب حضور داشته باشند آزمایش تعیین کلستریدیوم پرفرنژنس را در آب ا نجام می دهند تا کاملا آلودگی مد فوعی را مشخص کنند. معمولا نشان دهنده ی آلودگی قدیمی آب است و به عنوان یک ردیاب برای پیگیری سرنوشت پاتوژن ها پیشنهاد شده است.

1

ادامه نوشته

کلیفرم و توتال کلیفرم

کلی فرم ها به عنوان شاخص میکروبی مناسبی برای نشان دادن آلودگی مدفوعی در نمونه های آب مورد استفاده قرار می گیرند. از جمله ویژگی هایی که باعث شده این گروه از باکتری ها به عنوان شاخص میکروبی برای نشان دادن آلودگی مدفوعی آب مورد استفاده قرار گیرند عبارتند از:

- زیستگاه طبیعی آن ها در دستگاه گوارشی حیوانات خونگرم است لذا در مدفوع به تعداد زیاد حضور دارند.

- دوام آن ها در آب بیش از باکتری های بیماریزای روده ای است که این باعث می شود هر گاه باکتری های بیماریزای روده ای در آب حضور دارند کلی فرم ها هم وجود داشته باشند. 

- در آب تکثیر قابل توجهی ندارند زیرا زیستگاه طبیعی آن ها آب نیست بنابراین تعداد نسبی آن ها نسبت آلودگی مدفوعی در نمونه ای مختلف آب را نشان خواهد داد.

- کشت، شمارش و جداسازی آن ها در آزمایشگاه ساده تر از باکتری های بیماریزای روده ای است

با این وجود با گذشت زمان مشخص شد که همه باکتری هایی که در گروه کلی فرم ها قرار می گیرند منشأ مدفوعی ندارند بلکه برخی منشأیی غیر از مدفوع مثلاً از خاک دارند. بنابراین زیرگروهی در گروه کلی فرم ها تعریف شد که با توجه به اینکه منشأ آن ها از مدفوع بود و نه از زیستگاه های دیگر به آن ها کلی فرم های مدفوعی (fecal coliforms) می گویند. به کل کلی فرم ها (شامل مدفوعی و غیرمدفوعی) نیز توتال کلی فرم (total coliforms) می گویند.

کلی فرم های مدفوعی یا همان فکال کلی فرم ها باکتری هایی ترموتالرنت (مقاوم به گرما) یا اصطلاحاً گرماپای می باشند بدین معنی که قادرند تخمیر لاکتوز را با همان شرایطی که برای توتال کلی فرم ها ذکر شد انجام دهند ولی می توانند این فعالیت را در دمای 5/44 درجه سانتیگراد نیز انجام دهند.

بنابراین در روش های آزمایشگاهی شمارش توتال کلی فرم ها و فکال کلی فرم ها توانایی تخمیر لاکتوز با تولید اسید و گاز به ترتیب در دمای 35 درجه و 5/44 درجه مورد نظر قرار می گیرد.  

کشت باکتری و روشهای متداول آن

تعریف کشت :
هنگامیکه باکتریها در شرایطی مناسب قرار گیرند که قادر به تکثیر و رشد باشند اصطلاحا گفته می شود باکتری کشت داده شده است .
تعریف محیط کشت :
از آنجا که میکروب یک موجود تک سلولی بوده و قادر است کلیه اعمال حیاتی خود را مستقلا انجام دهد بدون آنکه نیاز به سلول دیگری داشته باشد . این اصل بیانگر آن است که میکروبها هم احتیاج به غذا و آب و موادآلی و معدنی دارند. محیطی مغذی که حاوی کلیه احتیاجات یک میکروب اعم از مواد غذایی و عناصر و غیره باشد که موجب رشد آن میکروب شود را اصطلاحا محیط کشت می گویند.
این محیط کشت می تواند بصورت دست ساز بوده یا یطور طبیعی یعنی داخل سلولهای بدن یک جانور باشد.
خون بهترین محیط برای رشد یک باکتری می باشد جون تمام احتیاجات یک بامتری اعم از اکسیزن ، مواد مغذی ، PH مناسب ، درجه حرارت لازم و غیره را برای یک باکتری فرآهم می کند.
میکروبها را می توان بر روی محیطها و در ظروف مختلف کشت داد که انتخاب شکل بستگی به نوع کشت داد. مثلا در کشتهایی که محیط آن مایع است ظروف کشت لوله ای می باشد و محیطهای جامد(آگاردار) هم در پلیت و هم در لوله کشت داده می شوند.

ادامه نوشته

روش رنگ آمیزی گرم

روش رنگ آمیزی گرم 

معروفترین نوع رنگ آمیزی مرکب نوع گرم می باشد . این روش مفیدترین روش تشخیص باکتریها می باشد.
میکروب شناسی ، بنام کریتستیان گرم در سال 1884 بطور تصادفی واکنشی را کشف کرد که بعدها واکنش رنگ آمیزی گرم نامیده شد.

ادامه نوشته

باکتریها و میکروارگانیسم های موجود در آب

باکتری ها میکروارگانیسم های تک سلولی هستند که معمولا بیرنگ بوده وپست ترین شکل از حیاتند.تعدادی از باکتری هامانند کلستریدیوم عامل کزازایجاد یک بیماری خاص واحد میکنداما بعضی طیف وسیعی از بیماری هاراسبب می شوندمثل استافیلوکک ائروس.اب همچنین ممکن است به عنوان منبع عفونت تلقی شود مثل باکتری ویبریوکلراکه سبب وبا می شود.انهاعلاوه برشکل باسیل(میله ای شکل مثل باسیلوس سوبتیلیس)ممکن است به شکل کوکسی(کروی مثل استرپتوکوکوس)واسپریلها(فنری )

ادامه نوشته

نمونه برداری از آب برای آزمونهای میکروبیولوژی

 

دانلود

دانلود نمونه برداری از یخ

 

دانلود

کلیات آزمون های کنترل کیفی آب

آزمایشات موجود در مبحث کنترل کیفیت آب بیشتر بر خصوصیات شاخص های آلودگی مانند اشیریشیا کلی و فلزات سنگبن وکاتیون ها آنیون های ویژه  بنا شده است

       در دوره برگزار شده آزمون ها بیشتر بر پایه میکروبیولوژی استوار بود و در سطح شرکت آب و فاضلاب آزمون های سنجش کلر باقیمانده – کدورت سنجی- ph- دما – رنگ و بوی آب   انجام می پذیرد و سپس طی فعالیتی به نام نمونه برداری  از منبع تامین آب و یا شبکه داخلی  حدود150 سی سی جهت انجام آزمایشات بعدی از قبیل mpn-   و تکمیلی (شناخت نوع کلی فرم) وتشخیصی ارسال می گردد

         

ادامه نوشته

نحوه آزمایشات میکروبی آب و فاضلاب

 

دانلود

اندازه گیری اکسیژن مورد نیاز واکنشهای شیمیایی (C . O . D)

روش  A   :

آزمایش پرمنگنات یک طریقه برای تعیین مقدار اکسیژن مورد نیاز مواد آلی و معدنی موجود در آب یا فاضلاب می باشد که مخففاً C .O .D نامیده می شود.

مواد مورد نیاز :

1- اسید سولفوریک 25 % :

cc 25 اسید سولفوریک غلیظ را به حجم cc100 برسانید.

2- پرمنگنات 01/0 نرمال :

cc 100 پرمنگنات پتاسیم تیترازول 1/0 نرمال را به حجم یک لیتر برسانید.

3- اسید اگزالیک 01/0 نرمال :

cc 100 اسید اگزالیک تیترازول 1/0 نرمال را به حجم یک لیتر برسانید.

ادامه نوشته

تعیین در صد سولفات در آب

مواد مورد نیاز:

    اسید کلریدریک غلیظ 37 درصد (d = 1.19)
    کلرور باریم  100 گرم در لیتر کلرور باریم (BaCl2.2H2O) را در آب مقطر حل نموده وحجم را به یک لیتر برسانید .
    محلول نیترات نقره 0.1 نرمال

وسائل مورد نیاز:

    بشر 100 و 500 میلی‌لیتری
    کاغذ صافی بافت متوسط (باند سفید) یا واتمن 40
    کاغذ صافی بافت ریز (باند آبی) یا واتمن 42

ادامه نوشته

اندازه گیری نیتروژن کل

اندازه گیری نیتروژن کل Total  Nitrogen :

( روش میکروکجلدال )

 

مواد مورد نیاز :

1- محلول استاندارد مادر آمونیاک :

819/3 گرم کلرید آمونیوم (NH4Cl) را در مقدار کمی آب مقطر حل کرده سپس با آب مقطر به حجم یک لیتر برسانید.

ml = 1 mg  N-NH3 1

2- محلول استاندارد آمونیاک :

cc 10 از محلول مادر استاندارد را در بالن ژوژه ریخته و با آب مقطر به حجم یک لیتر برسانید.      

 ml = 0.1 mg  N-NH3 1

3-محلول اسید بوریک 2 % :

 20گرم اسید بوریک (H3BO3) را در آب مقطر حل کرده و به حجم یک لیتر برسانید.

4

ادامه نوشته

تعیین مقدار کرومات در آب

کرومات را در آب بصورت CrO4-2 نشان داده می شود و بر حسب ppm اندازه گیری می شود.

نقش کرومات در صنعت:

وقتی کرومات به سیستم خنک کن صنعتی تزریق می شود ، یک لایه نازک (فیلم ) روی فلز خنک کن تشکیل می دهد که از خوردگی آندی جلوگیری می کند . یعنی اجازه نمی دهد فلز تمایل به اکسید داشته باشد.

در سیستمهائی که غلظت کلرور بالاست کرومات اضافه می کنند . هرچه میزان کلرور بالا باشد مقدار کرومات اضافه شده باید بیشتر باشد . در واقع کرومات یک محافظ خوبی برای جلوگیری از خوردگی در آبهای شور است .

در بعضی از سیستمها از کرومات و فسفات استفاده می شود . فسفات برای جلوگیری از تشکیل و ته نشین شدن رسوب و کرومات برای جلوگیری از خوردگی می باشد . نسبت کرومات و فسفات بستگس به PH محلول دارد . اگر PH قلیائی باشد ، مقدار فسفات بیشتر است .

کرومات در ظرفیت 6 از خوردگی جلوگیری می کند و Cr+3 تاثیری ندارد . بنابراین CrO4-2 و Cr2O7-2 می تواند از خوردگی جلوگیری کنند .

در ضد یخ کرومات وجود دارد که از خوردگی جلوگیری می کند .

ادامه نوشته

تعیین میزان آهن موجود در آب

آهن موجود در نمونه بصورت +Fe2 (فرو) و +Fe3(فریک) می تواند وجود داشته باشد . اندازه گیری آهن بر اساس آهن دو ظرفیتی یا فرو (+Fe2) می باشد . در روش رنگ سنجی با ارتوفنانترولین می توان +Fe2 و آهن کل (Total Iron) را تعیین کرد و در نتیجه +Fe3 (فریک) را می توان بدست آورد .

Total Iron = [Fe2+] +[Fe3+]    as ppm


[Fe3+]= Total Iron - [Fe2+]

تعیین مقدار مواد آلی در آب

منشا این ترکیبات آلی در آب خام ممکن است فاضلابها و یا خاکهائی که آب از روی آنها عبور نموده ، باشند. مبنای محاسبه بر اساس مصرف پر منگنات پتاسیم است که جهت اکسید کردن این مواد بکار گرفته می شود .

Organic Matter
(KMnO4 Consumption)

عموما مواد آلی موجود در آب را با اکسیژن مصرف شده جهت از بین رفتن آنها در نظر می گیرند :

Organic Matter
(O2 مورد نیاز)

البته روش استفاده کردن از دی کرومات پتاسیم که یک اکسید کننده می باشد نیز مرسوم است :

Organic Matter
(K2Cr2O7 Consmption)

طرز کار با مواد شیمیایی

کارخانه‌های تولید کننده ‌مواد شیمیائی علامتهای استانداردی روی ظرفهای محتوی مواد شیمیائی نصب می‌کنند .این علامتها نشان می‌دهد این مواد چه ‌خاصیتی  دارند و چگونه‌ باید با آنها کار کرد. کارخانه ‌سازنده برای آشنائی با طرز کار و نگهداری مواد یک‌ برچسب بنام برچسب ایمنی روی ظروف آنها می‌چسباند که این برچسب شامل سه علامت یا نشانه ‌مخصوص می‌باشد.

ادامه نوشته